摘要:为探究小蓟糖蛋白(Cirsii Herba glycoproteins, CHPs)对树突状细胞的免疫调节作用及其分子机制,采用流式细胞术、格里斯(Griess)法、酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)、实时荧光定量聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative polymerase chain reaction, qRT-PCR)和激光共聚焦显微镜等分别研究CHPs对树突状细胞的吞噬活性、一氧化氮(NO)产生、炎症因子和趋化因子的表达和分泌、表面分子表达的影响,并分析丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)、核因子κB(nuclear factor kappa-B, NF-κB)和Janus激酶-信号转导及转录激活因子(Janus kinase-signal transducer and activator of transcription, JAK-STAT)信号转导通路在其中的作用及CHPs可能的功能受体。结果表明,CHPs能显著抑制树突状细胞的吞噬活性,促进NO、白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、CXC趋化因子配体10(CXC chemokine ligand 10, CXCL10)的分泌,提高炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α、前列腺素内过氧化物合酶2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2, PTGS2)和CXCL10 mRNA的表达量,上调表面分子CD40、CD80、CD86、MHC Ⅰ和MHC Ⅱ的表达。在特异性通路抑制剂或Toll样受体4(Toll-like receptor 4, TLR4)抑制剂的作用下,CHPs刺激的NO分泌被显著抑制。此外,CHPs能与树突状细胞受体稳定结合,并观察到其与TLR4共定位。综上所述,CHPs可能是通过TLR4介导的MAPK、NF-κB和JAK-STAT通路激活树突状细胞,促进其成熟和发挥免疫功能。本研究为丰富中药小蓟的药效物质基础、拓宽其临床应用范围提供了理论依据。
关键词:小蓟;糖蛋白;树突状细胞;免疫调节