国家自然科学基金|沈阳农业大学武俊瑞教授、内蒙古农业大学杨续金副教授:芽孢杆菌SNBS-3抗菌肽W1脂质体制备、表征及其抑菌活性

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本文获国家自然科学基金面上项目 32172279；辽宁省“兴辽英才计划”项目 XLYC2213026；辽宁省“兴辽英才计划”项目 XLYC2402005；呼和浩特市科技计划项目 2023-揭榜挂帅-农-2；内蒙古自治区科技计划 2022YFHH0152；蒙牛全球研发创新中心乳品科学研究 院“征集全球最强大脑”项目202412056000038999；辽宁省科学技术计划项目 2024JH2/101900005；沈阳农业大学高层次人才引进项目 2023YJRC002；沈阳市科技创新平台项目 21-103-0-14；沈阳市科技创新平台项目 21-104-0-28）。

摘要

为解决抗菌肽在食品保鲜和医药应用中面临的稳定性差、易降解等问题，通过脂质体包埋技术提高抗菌肽W1的稳定性和生物利用度。从枯草芽孢杆菌SNBS-3中提取纯化抗菌肽W1，采用硫酸铵盐析、Sephadex-G25凝胶层析和高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）进行纯化，通过液相色谱-质谱（liquid chromatography-tandem mass spectrometry，LC-MS/MS）技术鉴定其分子序列。随后，采用薄膜分散法制备W1负载脂质体，并通过单因素实验与响应面试验确定最佳制备工艺。通过粒径、Zeta电位、包封率及微观结构分析评估脂质体的物理化学性质，并考察其在不同温度、pH及酶处理条件下的稳定性及抑菌活性。此外，细胞实验评估了W1脂质体对人肝细胞LO2的生物毒性。结果表明，经Sephadex-G25纯化获得高活性组分，HPLC进一步纯化得到核心抑菌峰，LC-MS/MS鉴定抗菌肽W1序列为IGLFGGAGVGK；脂质体最优制备条件为大豆脑磷脂（soybean phosphatidyl ethanolamine，SPE）与β-谷甾醇质量比为5.94:1、SPE与W1质量比为5.18:1和超声时间为6.75 min，在此条件下制得的W1脂质体的粒径为105.88±6.35 nm，包封率为68.2%±1.5%，表现出良好的物理化学稳定性。抗菌活性测试显示，W1脂质体对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为32 mg/mL。细胞毒性实验表明，W1脂质体在浓度低于512 mg/mL时对LO2细胞的存活率保持在90%以上（P>0.05），具有良好的生物相容性。综上，脂质体包埋技术显著提高了抗菌肽W1的稳定性和抗菌效果，为其在食品和医药领域的应用提供了新的解决方案。

作为最古老且有效的食品保鲜技术，低温贮藏在维持肌肉食品、水果和蔬菜的安全及质量方面发挥着关键作用，根据贮藏环境温度的不同，现代工业中通常以冷藏（0~4 ℃）和冷冻（低于−18 ℃）两种方式来提高产品的品质稳定性。近年来，与传统肉制品相比，调理牛排因其食用方便、营养均衡等优势，越来越受到消费者的青睐。调理牛排产品通常采用冷藏或者冷冻方式进行贮运销售。传统的冷藏技术货架期较短，难以进行长线的冷链运输；此外，尽管冷冻技术可以大幅度延长货架期，但是贮藏过程中冰晶的生长/再结晶会对肌肉组织造成剧烈的机械损伤，解冻后过多的汁液损失会直接损害行业的经济效益和消费者的健康需求。因此，有必要开发新型的低温保存技术以维持食品原有的品质。

抗菌肽是一类广泛存在于生物体内的天然活性分子，具有广谱抗菌、抗病毒和抗真菌等多种生物活性。由于其独特的抗菌机制，抗菌肽不易引发微生物耐药性，因此在食品保鲜、医药和农业领域展现出巨大的应用潜力。然而，抗菌肽在实际应用中面临稳定性差、易被蛋白酶降解以及在复杂环境中活性降低等问题，限制了其广泛应用。近年来，研究人员通过化学修饰、纳米载体包埋等手段提高抗菌肽的稳定性和生物利用度，其中脂质体作为一种生物相容性良好的纳米载体，成为抗菌肽递送系统的研究热点。 

脂质体是由磷脂双分子层构成的纳米级囊泡，具有良好的生物相容性、可降解性和低毒性。脂质体能够包埋亲水性和疏水性物质，广泛应用于药物传递、功能性食品和化妆品领域。其作为一种有效的载体系统，被用于包埋抗菌肽以提高其稳定性和长效抑菌能力。通过脂质体包埋，抗菌肽可以免受外界环境（如温度、pH和酶降解）的影响，同时实现目标物质的精确释放。例如Li等以白藜芦醇与蛋黄卵磷脂为原料，构建了载细菌素CAMT6纳米脂质体，包封率达97.32%，在牛奶等复杂食品体系中保持抑制李斯特菌活性。 

前期研究表明，枯草芽孢杆菌SNBS-3可产生多种抑菌物质。本研究以该菌株为来源，提取并纯化抗菌肽W1，采用硫酸铵盐析、Sephadex-G25凝胶层析及高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）获得高纯度W1，并利用液相色谱-串联质谱（liquid chromatography-tandem mass spectrometry，LC-MS/MS）技术鉴定其分子序列。为提高W1的稳定性和应用潜力，采用薄膜分散法制备W1负载脂质体，并通过单因素实验与响应面试验确定最佳制备工艺。通过粒径、Zeta电位、包封率及微观结构分析评估脂质体的物理化学性质，同时考察其在不同温度、pH及酶处理条件下的稳定性及对金黄色葡萄球菌的抑菌活性。细胞实验还评估了W1脂质体对人肝细胞LO2的生物毒性，为其在食品和医药领域的安全应用提供依据

结果与分析

2.1  抗菌肽W1的提取、纯化与鉴定结果

2.1.1   粗提样品抑菌效果与蛋白质含量

采用硫酸铵沉淀法对枯草芽孢杆菌SNBS-3进行提取，粗提物表现出明显的抑制金黄色葡萄球菌J1效果，抑菌圈直径为16.22±2.34 mm。而硫酸铵对照组未表现出抑菌活性，表明枯草芽孢杆菌SNBS-3能够产生具有抗菌活性的成分，这与纪帅奇等的研究结果一致。根据BCA法测定，粗提取物中的蛋白质浓度为0.22 mg/mL，表明硫酸铵沉淀法能够有效提取出具有抗菌活性的蛋白质成分。

2.1.2   提取物纯化与活性分析

通过Sephadex-G25凝胶过滤层析，粗提物被分离为三个主要洗脱峰（Sephadex 1，Sephadex 2，Sephadex 3），结果见图1。其中，第二个洗脱峰（Sephadex 2）显示出较高的峰值。琼脂打孔法测定各洗脱峰对金黄色葡萄球菌J1的抑菌活性显示（表3），Sephadex 2峰的抑菌圈直径显著大于Sephadex 1峰和Sephadex 3峰（P<0.05），表明Sephadex 2组分含有主要的抗菌活性物质。进一步通过HPLC分离Sephadex 2峰，得到三个主要峰（HPLC 1，HPLC 2，HPLC 3），结果见图2，其中第三个峰HPLC 3（洗脱时间约为7.935 min）显示出最高的峰值。抗菌活性测试（表3）证实HPLC 3峰具有最强的抑菌活性（抑菌圈直径：17.35±0.19 mm），显著高于HPLC 1和HPLC 2峰（P<0.05），表明该组分具有潜在的抗菌肽活性。

图  1葡聚糖凝胶Sephadex-G25层析结果

Figure  1.Results of Sephadex-G25 gel chromatography

表  3Sephadex-G25洗脱峰及HPLC分离组分的抗菌活性（mm）

Table  3.Elution peak of Sephadex-G25 and antibacterial activity of separated components by HPLC (mm)

注：不同大写、小写字母表示组间数据差异显著（P<0.05）。

图  2高效液相色谱结果

Figure  2.High performance liquid chromatography results

2.1.3   抗菌肽W1的鉴定

通过LC-MS/MS技术分析，鉴定出一个多肽序列IGLFGGAGVGK。该序列的质谱评分（Score值293.67）、序列覆盖率（5.3%）和分子量（0.975 kDa）均支持其可信度。质谱图（图3）进一步验证了该序列的正确性，并通过Antimicrobial Peptide Scanner分析确认其具有抗菌活性。

图  3抗菌肽W1质谱图

Figure  3.Mass spectrum of antimicrobial peptide W1

2.1.4   W1的抑菌谱分析

W1对革兰氏阳性菌（如金黄色葡萄球菌J1和单增李斯特菌DL-2）表现出较强的抑制效果，抑菌圈直径分别为17.30±0.21 mm和16.56±0.10 mm，实验结果如表4。对革兰氏阴性菌的抑制效果较弱，而对真菌（如青霉菌Q1和灰霉菌H3）则显示出一定的抑制效果。

表  4W1抑菌谱测定结果（mm）

Table  4.Results of W1 bacteriostatic assay (mm)

注：不同小写字母表示组间数据差异显著（P<0.05）。

2.2   负载W1脂质体壁材的筛选结果

2.2.1   空脂质体粒径、Zeta电位、PDI值测定

表5展示了使用不同磷脂（EPC、SPC和SPE）制备的脂质体的粒径、PDI和Zeta电位。结果表明，SPC、EPC和SPE脂质体的平均粒径分别为135.2±12.5 nm、157.4±10.1 nm和109±15.2 nm。其中，SPE脂质体的粒径最小，表明其具有较低的聚集倾向和更好的稳定性。PDI值用于评估脂质体的粒径分布均匀性，EPC脂质体的PDI值为0.326，略高于SPC和SPE脂质体，表明其粒径分布均匀性稍差。Zeta电位是衡量脂质体稳定性的关键指标，绝对值大于30 mV表明系统稳定性较高。实验结果显示，三种磷脂制备的脂质体Zeta电位绝对值均大于30 mV，表明其具有强静电排斥力，能够有效减少颗粒聚集。

表  5脂质体的平均粒径、PDI值及Zeta电位

Table  5.Average vesicle size, PDI and Zeta potential of liposomes

注：同列不同小写字母表示组间数据差异显著（P<0.05）。

2.2.2   原子力显微镜观察

图4展示了由不同磷脂（SPC、EPC、SPE）制备的空脂质体的表面形貌。通过原子力显微镜（AFM）图像可观察到，SPC与EPC脂质体普遍存在粒径较大的聚集体，且颗粒轮廓较为模糊，尤其是EPC脂质体，其粒子间黏连现象更为显著。这种结构模糊性表明其脂质体间可能存在较强的吸附或融合行为。相应地，在2.2.1节中EPC脂质体的平均粒径为157.4±10.1 nm，PDI值为0.326±0.1，明显高于SPE脂质体，说明其粒径分布较宽、聚集倾向更强。相较之下，SPE脂质体在形貌上表现出较高的规则性和分散性，AFM图像显示其脂质体粒子形貌清晰，大多数呈规则球形，粒径分布集中，几乎未观察到明显的聚集现象，这与前人研究成功制备的脂质体表征相似，并且与2.2.1节所测得SPE的最低平均粒径（109±15.2 nm）、最低PDI值（0.256±0.1）及较高Zeta电位绝对值（−60.3±2.7 mV）高度一致，表明SPE脂质体具有良好的结构稳定性和分散性。

图  4SPC（a）、EPC（b）及SPE（c）脂质体原子力显微镜成像

Figure  4.Atomic force microscope imaging of SPC (a), EPC (b), and SPE (c) liposomes

2.2.3   衰减全反射-傅里叶变换红外光谱测定

衰减全反射-傅里叶变换红外光谱（attenuated total reflectance-fourier transform infrared spectroscopy，ATR-FTIR）技术可通过分析分子键的振动模式，表征脂质体的化学组成、分子构象及相互作用机制。由图5可知，SPC和EPC在形成脂质体过程中，CH2和PO2−的对称及不对称伸缩振动峰未发生显著变化，表明脂质分子间相互作用力较弱。然而，SPE脂质体中CH2的对称伸缩振动峰从2856 cm−1移至2847 cm−1，不对称伸缩振动峰从2923 cm−1移至2915 cm−1，这可能是由于SPE中高饱和脂肪酸含量增强了分子间作用力，限制了CH2的振动。此外，SPE脂质体中N（CH3）3+和C=O的特征吸收峰分别从966 cm−1和1730 cm−1偏移至969 cm−1和1736 cm−1，表明胆碱基团和羰基构象发生了部分变化。同时，PO2−的对称和非对称伸缩振动峰分别从1095 cm−1和1255 cm−1移至1090 cm−1和1236 cm−1，表明PO2−基团与β-谷甾醇的羟基之间形成了氢键。这些结果表明，SPE脂质体中脂质分子间存在较强的疏水相互作用、范德华力和氢键作用，验证了脑磷脂脂质体的成功制备。

图  5脂质体及不同磷脂的ATR-FTIR吸收光谱

Figure  5.ATR-FTIR spectra of the phospholipids and liposomes

2.2.4    拉曼光谱测定

通过拉曼光谱分析，研究了脂质体在不同波段的构象变化及其分子排列有序性。由图6可知，在600至800 cm−1和1300至1600 cm−1波段，脂质体的拉曼光谱显示，头部胆碱基团的C-N对称伸缩振动在718 cm−1处呈现扭曲构象，而外源性分子干扰可使其振动频率移至770 cm−1并转变为反式构象。1440 cm−1处的峰主要源于CH2的变角振动，对头部极性构象变化的敏感性较低。通过I718/I1440比值可监测胆碱基团构象的变化，而I2890/I2850比值（分别对应CH2的对称和反对称伸缩振动）则用于评估脂质分子横向排列的有序性。结果表明，含β-谷甾醇的SPC、EPC和SPE脂质体的I2890/I2850比值相近，表明β-谷甾醇显著增强了不同脂质体分子间的稳定性和紧密程度，这与Song等发现甾醇提高了膜的刚性并降低了膜的变形性一致。相比之下，SPE-β-谷甾醇的I718/I1440比值较低，表明其头部区域构象变化更为显著，可能形成了更有序、更紧密的结构，从而增强了脂质相互作用和膜稳定性，揭示了SPE-β-谷甾醇在药物传递和脂质体基础研究中的潜在优势。

图  6拉曼光谱分析

Figure  6.Raman spectrum analysis

注：不同大写、小写字母表示组间数据差异显著（P<0.05）。

2.3  负载W1的SPE脂质体制备工艺优化结果与分析

实验研究了SPE与β-谷甾醇比例、SPE与W1质量比以及超声时间对脂质体性能的影响。图7结果表明，当SPE与β-谷甾醇比例为6:1时，脂质体粒径最小且PDI值低于0.3，包封率达到最高，表明该条件下脂质体分散性和稳定性最佳，这可能是由于β-谷甾醇含量对膜流动性的调节作用。此外，SPE与W1质量比的优化实验显示，当比例为5:1时，包埋率最高，粒径较小且PDI值低于0.3，电位绝对值大于30 mV，表明体系具有较好的均一性和稳定性；而过高或过低的SPE与W1比例会导致体系不稳定和包埋率下降。超声时间的影响研究表明，随着超声时间增加，脂质体粒径逐渐减小，但超过7 min后，PDI值增大且包埋率下降，表明过长的超声时间可能导致脂质体膜氧化破裂，从而影响分散性和包埋效率。

图  7不同因素对脂质体粒径、PDI值、Zeta电位、包埋率的影响

Figure  7.Effects of different factors on particle size, PDI, Zeta potential and entrapment efficiency of liposomes

2.4  响应面优化结果

前期试验表明，SPE与β-谷甾醇质量之比、SPE与W1质量之比和超声时间这三个因素对脂质体包埋率有明显影响，因此在试验的基础上，分别对SPE:β-谷甾醇（A）、SPE:W1（B）与超声时间（C）三个因素选取三个水平，以包封率作为指标，进行Box-Benhnken响应面设计优化试验，以包封率为响应值的二次回归方程为： 

Y=68.23−1.03×A+1.47×B−0.71×C−0.15×AB−1.81×AC−2.45×BC−7.22×A2−5.08×B2−4.21×C2。试验结果如表6所示。

表  6Box-Behnken试验设计及其结果

Table  6.Design and results of Box-Behnken experiments

如表7所示，方差分析表明，所采用的模型在极显著水平上有效（P<0.01），而失拟项的P值为0.2533（>0.05），表明差异不显著，从而验证了模型与实际观测值之间拥有良好的拟合度，确保了试验设计的结果的可靠性。模型的相关系数R2为0.9905，显示出极强的相关性；而修正的决定系数R2Adj为0.9782，意味着有97.8%的数据变异可以通过该回归模型来解释；CV值等于1.39%，表示试验的可信度和精确度良好。SPE:β-谷甾醇、SPE:W1与超声时间，这三个因素中两两相互作用对包封率大小的影响结果如图8所示，SPE:β-谷甾醇和超声时间、SPE:W1和超声时间交互作用对响应值的影响明显。

表  7回归模型方差分析

Table  7.Variance analysis of regression model

注：P<0.01，为极显著，用“++”表示；P<0.05，为显著，用“+”表示；P>0.05，为不显著。

图  8响应面优化结果

Figure  8.Response surface optimization results

根据上述分析及Box-Behnken软件预测，获得负载W1的纳米脂质体最佳制备工艺的条件为：SPE与β-谷甾醇质量比为5.94:1、SPE与W1质量比为5.18:1和超声时间为6.75 min。在此条件下进行的三组重复性试验结果显示，此时预测的最大包封率为68.433%，后在此最佳的配比模型下进行3次验证性试验，结果得到包封率为68.4%±1.5%，与先前的理论预测结果较为相近，说明模型的拟合程度较好，回归方程对脂质体最佳制备工艺的分析和预测有效。在此条件下，制备的脂质体平均粒径为105.88±6.35 nm，包封率达68.2%±1.5%，电位值为−54.1±4.3 mV。

2.5  W1脂质体透射电镜结果

采用透射电子显微镜对通过响应面优化方法制备的W1脂质体进行表征，结果如图9所示。可以观察到，W1脂质体呈球形结构，表面光滑，具有明显的双层磷脂膜包裹，这是脂质体的典型结构特征。此外，粒子之间尺寸均一，未见明显聚集现象，表明该制备方法具有良好的重复性与分散性。双层膜结构完整的脂质体在体内具有更好的稳定性，可延缓药物释放、提高递送效率。在本研究中，W1脂质体表现出良好的膜结构清晰度，暗示其具备较强的结构稳定性，这与2.2节中空脑磷脂脂质体Zeta电位和粒径分布结果相一致。已有研究指出，粒径小且分布均一的脂质体在体内的分布行为更具可控性，更易穿透生物屏障并实现靶向递送。W1脂质体的形貌特征表明其具有潜在的应用优势，尤其在需要高封装效率和稳定性的药物递送系统中具有较高价值。

图  9透射电子显微镜下的脂质体

Figure  9.Liposomes under transmission electron microscope

2.6  W1脂质体的抑菌活性测定结果

本试验通过测定MIC来评价W1对金黄色葡萄球菌J1的抑制效果。试验得到的MIC值如表8所示，W1和W1脂质体对金黄色葡萄球菌J1的MIC都为32 mg/mL。W1在包封前后的MIC值相同，表明其抗菌活性并未受到影响，这与Changsan等的研究结果一致。

表  8W1和W1脂质体对金黄色葡萄球菌的MIC值

Table  8.MIC values of W1 and W1 liposomes against Staphylococcus aureus

由表9可知，W1脂质体对革兰氏阳性菌有较强的抑制效果，对金黄色葡萄球菌J1、单增李斯特菌DL-2表现出良好的抑制效果。而对革兰氏阴性菌的抑制效果较弱，例如沙门氏菌S2和铜绿假单胞菌K2几乎无抑制效果。真菌方面，对曲青霉菌Q1和灰霉菌H3则显示出一定的抑制效果。这与2.1.4中W1的抑菌谱结果相似。

表  9W1脂质体抑菌谱测定（mm）

Table  9.Determination of bacteriostatic profile of W1 liposomes (mm)

注：不同小写字母表示组间数据差异显著（P<0.05）。

2.7  W1脂质体的稳定性测定结果

图10实验结果表明，W1和W1脂质体的抑菌活性在不同温度、pH和酶处理条件下表现出显著差异（P<0.05）。温度处理方面，随着温度升高，两者的抑菌活性均有所下降，这可能是由于高温导致W1活性成分的结构变性或降解。然而，W1脂质体在60和80 ℃时仍能维持较高的抑菌活性，说明脂质体包埋能减缓温度对其活性的破坏。这种保护效应可能来源于磷脂双层对活性成分的热屏障作用，抑制其与外界高温环境的直接接触。pH处理方面，W1脂质体在pH1和pH11等极端条件下的抑菌效果仍优于未包埋的W1。这一现象可能与脂质体包裹结构对酸碱条件的缓冲作用有关，能有效延缓内容物暴露于极端pH环境，从而保持其生物活性。此外，在木瓜蛋白酶和蛋白酶K处理下，W1的活性显著下降，而W1脂质体则维持较高水平的抑菌效果。说明脂质体不仅对物理条件具有保护作用，在酶降解方面也具有一定的屏障效果。这些结果表明，脂质体通过其独特的包裹结构，显著提升了W1在多种胁迫环境下的稳定性和抑菌能力。相比于游离态的W1，其更适合作为食品添加剂应用于复杂加工与储藏条件下，如高温杀菌、pH波动和酶活性存在的肉制品加工过程中。

图  10W1和W1脂质体不同条件处理后的抑菌效果

Figure  10.Antibacterial effects of W1 and W1 liposomes treated under different conditions

注：不同大写、小写字母表示组间数据差异显著（P<0.05）。

由图11（a）可知，存储初期W1脂质体的粒径保持较稳定状态，14 d贮存期间粒径变化不明显。然而，随着时间延长至28 d，包封率逐渐下降且脂质体粒径有所增大，这可能因为贮存期间脂质体内部结构逐渐聚集，部分脂质体形态发生破裂，进而影响包埋效果。由图11（b）可知，随着贮藏时间的增加，W1脂质体的PDI值逐渐增大，而Zeta电位的绝对值逐渐减小。PDI值的增大表明脂质体的粒径分布逐渐变宽，即粒径的均匀性有所下降，这与粒径变化的结果相一致，进一步证实了脂质体在长期贮藏过程中出现了一定程度的聚集现象。Zeta电位绝对值的减小则表明脂质体表面的电荷密度降低，静电排斥力减弱，这可能是导致脂质体聚集倾向增加的原因之一。 

图  11W1脂质体在4 ℃下贮藏28 d内的变化

Figure  11.Changes of W1 liposomes stored at 4 ℃ for 28 days

2.8  W1脂质体生物毒性测定

研究表明，环境中的不可降解纳米颗粒可能通过食物链积累并在人体内富集，对人类健康构成潜在风险。为探究脂质体包埋抗菌肽W1对正常人类肝细胞LO2的生物毒性，本研究评估了不同浓度W1脂质体对细胞活性的影响。图12结果表明，当W1脂质体浓度低于512 mg/mL时，细胞存活率与对照组无显著差异（P>0.05），均保持在90%以上，表明该浓度范围内具有较高的生物安全性；然而，当浓度增至2048 mg/mL时，细胞存活率显著（P<0.05）下降至30%以下，超出安全阈值。因此，初步研究表明，W1脂质体在食品应用中的安全浓度应控制在512 mg/mL以下。

图  12W1脂质体毒理学结果

Figure  12.Toxicological results of W1 liposomes

注：不同小写字母表示组间数据差异显著（P<0.05）。

结论

本研究从枯草芽孢杆菌SNBS-3中提取并鉴定出抗菌肽W1，经硫酸铵沉淀、Sephadex G-25纯化和LC-MS分析确定其结构。采用薄膜分散法制备的SPE脂质体粒径为105.88±6.35 nm，包封率达68.2%±1.5%，表现出良好的热稳定性、碱稳定性及抗蛋白酶能力，显著提升了W1的稳定性和抗菌效果。与既有研究相比，本研究不仅获得来源安全的天然抗菌肽，还通过脂质体包埋技术增强了其在中性及微碱环境下对金黄色葡萄球菌等病原菌的抑制能力，拓展了其在食品保鲜等领域的应用潜力，具有一定的理论创新与实用价值。但本研究仍存在一些限制，如W1脂质体的作用机制尚不明确，其在复杂食品体系中的行为及长期稳定性需进一步研究。未来应聚焦于机制解析及实际应用评估。综上，SPE脂质体包埋的W1抗菌肽为天然、安全的食品保鲜新策略提供了有力支撑，具备广阔的应用前景。 

通讯作者简介

武俊瑞，博士，教授，博士生导师，博士后合作导师，沈阳农业大学食品学院。现任辽宁省食品发酵技术工程研究中心常务副主任，沈阳市微生物发酵技术创新重点实验室主任，国家农业微生物种质资源库益生菌研究中心负责人、国家林业和草原局山野菜重点实验室发酵食品负责人。主要研究方向：益生菌发酵食品、乳制品、生物智能制造等。人才称号和荣誉：中国食品工业科技创新杰出人才；辽宁省“兴辽英才”；辽宁省百千万人才工程千人；辽宁省创新人才；辽宁省杰出青年学者成长计划；沈阳市中青年科技创新领军人才；沈阳市高层次领军人才；沈阳市高层次拔尖人才；辽宁省农产品加工科技特派团团长；天柱山英才；荷兰瓦赫宁根大学访问学者；2014-2024、2015-2025连续入选全国高被引学者TOP 1%；国家重点图书出版规划委员会编委。

社会兼职情况：兼任ISRNN、ADSA、IFT会员；国家食药同源联盟理事兼发酵专委会委员；中国微生态与健康专委会常务委员；中国肠微生态-疾病整合联盟科技顾问；北京伍连德公益基金会微生态健康管理专委会委员；中国微生物学会酿造分会专委会委员；中国科学院沈阳转移中心科技顾问；大连理工大学特聘研究员；中国奶业协会乳品营养与健康专委会委员、乳品精深加工与产品创新专业委员会、乳品工业专委会委员、特色乳专委会委员；全国无抗产业科技创新联盟常务理事；中国食品科学技术学会、中国农学会农产品贮藏加工分会、中国功能性食品产业联盟、中国微米纳米学会理事；中药协会生物发酵专委会委员；国家市场总局审评专家；国家林业和草原局教材评审委员会专家；蒙牛乳业重点实验室学术委员会委员；辽宁省微生态专委会副主任委员；辽宁省营养学会、辽宁省食品安全专家委员会专家；辽宁省食品科学技术学会监事等。蒙牛、伊利、海天、青岛啤酒、辉山、雨润、欣和等多家国内大型食品企业专家顾问等。

《中国乳业》《乳品与人类》杂志副主编，《iMeta》《Journal of Future Foods》《Food Science of Animal Products》《Foods》、《Frontiers in Microbiology》《Frontiers in Nutrition》《中国微生态学杂志》《乳业科学与技术》《中国乳品工业》《中国果菜》等杂志编委或客座主编。

国家人才项目、国家科技重大项目、国家重点研发项目、国家自然科学基金、国际合作项目、国家出版基金、国家博士后基金、科技部、教育部、农业农村部、中国科协、国家林草局、中国农学会、中国轻工联合会、中国食品工业协会、中国乳制品工业协会、中国奶业协会、辽宁省科技厅、湖北省科技厅、云南省科技厅、广西科技厅、河南省科技厅、沈阳市科技局等评审专家。Nature Food、iMeta、Nature Communication、Trends in Food Science & Technology、Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety、Food Chemistry等杂志审稿专家。

（以上信息来自沈阳农业大学食品学院官网）

杨续金，副教授，内蒙古农业大学食品科学与工程学院硕士生导师。研究领域：农产品加工及贮藏工程；乳品工程（小品种乳营养功能及产品开发）。中国畜产品加工研究会常务理事；农业农村部农业重大技术推广内蒙古自治区技术首席；内蒙古职工创新工作室-内蒙古农业大学杨续金创新工作室负责人；内蒙古自治区奶业加工团队岗位专家；呼和浩特市科技特派团技术首席专家；“绵羊乳营养与健康工程技术”创新联合体技术首席专家；二连浩特市科技特派团技术首席专家；内蒙古老绥元羊肉烧麦创新联合体首席技术专家。

（以上信息来自内蒙古农业大学官网）