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IF=6.2!东北农业大学动物科学技术学院:共发酵通过蛋白质结构重塑和肽段生成实现羽毛粉的高值化利用,提升其体内外抗氧化能力

  • 2026-10-22 02:18:04
IF=6.2!东北农业大学动物科学技术学院:共发酵通过蛋白质结构重塑和肽段生成实现羽毛粉的高值化利用,提升其体内外抗氧化能力

图文来源:作者团队

共发酵通过蛋白质结构重塑和肽段生成实现羽毛粉的高值化利用,提升其体内外抗氧化能力

东北农业大学动物科学技术学院:Wanting Zhang(第一作者),石宝明教授(通讯作者)等在期刊《Food Bioscience》 (IF:6.2)上发表了题目为“Co-fermentation valorizes feather meal via protein structure remodeling and peptide production to improve antioxidant capacity in vivo and in vitro”的论文。

01
研究概述

羽毛粉富含蛋白质,但其高角蛋白含量和氨基酸组成不平衡限制了其作为优质动物蛋白的应用。本研究旨在分离一株产角蛋白酶酵母,并建立微生物-酶共发酵工艺以实现羽毛粉的高值化利用,从而将角蛋白结构解构与理化性质变化、多肽谱图、抗氧化活性及肉鸡体内功能效应相关联。分离得到一株产角蛋白酶的菌株Pichia kudriavzevii Ker01,其粗角蛋白酶的最适反应温度为40°C,最适pH为8.0。采用响应面法优化共发酵工艺,在含水量56.7%、酶添加量0.44%、接种量6%、温度38°C、发酵时间7天的条件下,三氯乙酸可溶性多肽含量达到54.2%。共发酵改变了羽毛粉的化学组成,提升了其营养价值。羽毛粉的结构也得到重塑,β-折叠和聚集链转化为无规卷曲和β-转角,同时粒径、二硫键含量、表面疏水性和非共价相互作用降低,绝对Zeta电位和溶解度升高。这些变化与体外抗氧化活性的提高及抗氧化肽的生成相关。在肉鸡中,日粮添加发酵羽毛粉可剂量依赖性地增强肝脏和肠道中的过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力,并增加盲肠短链脂肪酸含量,后者与肝脏抗氧化能力呈正相关。本研究为羽毛粉向功能性多肽的高值化转化提供了一种高效、环保的策略,并揭示了共发酵过程中角蛋白结构解构如何转化为抗氧化功能的改善。

02
研究背景

羽毛约占家禽总体重的5%~7%,是家禽养殖过程中产生的主要废弃物之一。国际家禽业每年产生数百万吨的羽毛废料,给环境和废弃物处理带来严峻挑战。羽毛粉是羽毛加工后的产物,是一种具有潜力的替代蛋白来源,其粗蛋白含量约为85%,并含有多种氨基酸、矿物质元素及维生素B和E。然而,羽毛粉作为优质蛋白源的广泛应用受到其固有特性的严重制约。具体而言,羽毛粉中的蛋白质主要由角蛋白组成,其具有高度有序的螺旋结构,通过二硫键以及极性和非极性相互作用的广泛交联而稳定,导致其高度不溶且难以被酶解。此外,氨基酸组成的不平衡进一步加剧了这些缺陷,阻碍了其利用。而且,传统热加工制备的羽毛粉常存在蛋白质水解不均匀、氨基酸损失及抗营养因子生成等问题,导致其生物学价值显著降低。因此,开发一种高效、绿色的改性技术以破解角蛋白结构并改善羽毛粉的营养品质,是其高值化利用中亟待解决的核心瓶颈。

发酵技术作为一种传统且环境友好的生物转化方法,因其反应条件温和、产品安全性高和可控性强等显著优点,已被广泛应用于蛋白质资源的改性。发酵过程中涉及的微生物可分泌多种酶或还原剂,特异性裂解角蛋白的二硫键和肽键,从而将不溶性角蛋白转化为可溶性小肽片段和游离氨基酸。在已报道的方法中,基于芽孢杆菌的羽毛降解最为常用。进一步研究表明,利用来源于枯草芽孢杆菌的工程化角蛋白酶发酵羽毛粉可提高小肽含量,而角蛋白酶突变体可获得最高的羽毛水解率、肽和总氨基酸水平。毕赤酵母因其安全性好、耐受性强以及能够分泌胞外酶和生物活性代谢物而被广泛应用于食品和饲料发酵。特别是,毕赤酵母在生物技术领域已成为成熟的分泌表达宿主,但关于产角蛋白酶毕赤酵母菌株及其在羽毛粉生物转化中应用的报道仍较为有限。因此,探索毕赤酵母在羽毛粉生物加工中的应用,可能为将羽毛角蛋白转化为高附加值多肽提供一种更安全且更具饲料兼容性的发酵平台。据此,本研究旨在筛选一株高效的毕赤酵母菌株用于羽毛粉改性,表征其角蛋白酶特性,并整合微生物发酵与外源酶添加以最大化多肽释放。

氧化应激与家禽的生长受阻、免疫功能紊乱和疾病易感性密切相关。肠道微生物代谢产物,尤其是短链脂肪酸,是连接饮食与氧化还原状态及炎症状态的关键介质,不仅作为终产物发挥作用,还作为信号分子调控代谢和免疫功能。与此同时,源自食品和饲料蛋白的抗氧化肽在动物生产中备受关注。酶解或微生物水解羽毛粉已被证明可提高氨基酸的可用性,在某些情况下还能产生具有抗氧化、抗菌或抗炎活性的肽组分。然而,许多角蛋白降解系统主要关注蛋白质回收而非结构-功能关联。关于角蛋白结构重塑如何影响多肽释放、理化性质和特定生物活性,以及其产物能否调节体内抗氧化状态和短链脂肪酸,目前仍缺乏机制层面的理解。

03
研究方法与结论

本研究采用微生物-酶共发酵制备富含羽毛肽的发酵羽毛粉,并将角蛋白结构修饰与理化性质变化、多肽谱图和抗氧化能力相关联。随后,我们评估了日粮中添加发酵羽毛粉对肉鸡抗氧化防御和盲肠短链脂肪酸的影响,并通过相关性分析将短链脂肪酸变化与肝脏氧化还原指标联系起来,从而构建结构-性质-功能框架。预期本研究可为将羽毛粉升级为功能性饲料原料提供机制性和应用导向的框架,并支持循环生物经济的理念。

本研究基于产角蛋白酶酵母Pichia kudriavzevii Ker01建立并优化了微生物-酶共发酵工艺,使三氯乙酸可溶性多肽得率提高至54.2%,为羽毛角蛋白的高值化利用提供了一条高效、绿色的技术路径。从结构角度来看,研究揭示了该工艺在重塑角蛋白构象中的关键作用,促进了β-折叠向无规卷曲的转变,削弱了二硫键和分子间作用力,从而释放出具有显著体外抗氧化活性的小分子多肽。进一步的动物实验证实,发酵产物能够增强肉鸡的抗氧化能力并提高盲肠短链脂肪酸含量。综上所述,本研究构建了“结构解构—功能转化—生物效应”的完整技术链条,不仅为多肽产品的生产提供了一种可持续途径,还将羽毛粉从单纯的蛋白来源升级为具有抗氧化和肠-肝轴调节潜力的功能性原料,有助于推动循环型、健康促进型饲料体系的发展。

04
创新点

·  分离得到一株可用于羽毛粉高效生物转化的菌株Pichia kudriavzevii Ker01。

·  共发酵重塑了羽毛粉的蛋白质结构及理化性质。

·  结构解构显著提高了多肽得率和体外抗氧化活性。

·  发酵羽毛粉可剂量依赖性地改善肉鸡肝脏和肠道的氧化还原状态。

·  发酵羽毛粉对盲肠短链脂肪酸谱具有有益的调节作用。

05
图文赏析

基金支撑:

本研究得到黑龙江省重大科技成果产业化项目(CG24019)的资助。

原文链接:

https://doi.org/10.1016/j.fbio.2026.109325

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翻译:杜润峰

编辑:科研小助

审核:杨静

专家指导:张丽霞

供稿团队:花生资源挖掘与品质调控创新团队

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