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华南农业大学:龚蓓妮团队从长期施用畜禽粪肥的农田土壤中分离得到一株具有TC去除能力的细菌TC931

  • 2026-06-21 11:31:24
华南农业大学:龚蓓妮团队从长期施用畜禽粪肥的农田土壤中分离得到一株具有TC去除能力的细菌TC931
01
摘要

Zewen Tan, Jiacheng Chen等人于“Bioresource Technology”发表了题为 “四环素胁迫下常州鞘氨醇杆菌TC931的生存、清除机制及其应用后的生态安全性”的研究论文。该研究从长期施用畜禽粪肥的农田土壤中分离得到一株具有TC去除能力的细菌TC931,并鉴定为常州纱线杆菌(Sphingobacterium changzhouense)。研究发现,TC931对TC的去除并非单一过程,而是由胞外聚合物(EPS)吸附、细胞表面吸附和生物降解共同完成。此外,菌株在培养第2天和第3天分别去除了57.88%和87.38%的TC,明显高于单纯水解作用。根据进一步分析显示,EPS和细胞表面的多糖、蛋白质和烃类官能团均参与了TC结合;研究还通过UPLC-QTOF-MSMS,鉴定出了8种可能的生物转化产物,并提出了潜在降解途径。全基因组分析显示,TC931携带adeF、aadS和tetX等抗性相关基因,且含有不完整的抗生素抗性基因岛,因此其作为环境修复菌使用时仍需开展长期生态安全监测。

原文链接:https://doi.org/10.1016/j.biortech.2021.125067

02
结果与讨论
菌株TC931的鉴定与TC去除能力

系统发育结果表明,TC931属于常州纱线杆菌。动力学结果显示,TC在无菌体系中确实会发生一定水解,但水解贡献有限:初始pH 7和pH 9条件下,2天内水解效率分别约为14.92% 和15.14%。接种TC931后,TC去除速率显著提高,一级动力学拟合效果良好,说明菌株活动对 TC 消减具有明确促进作用。培养过程中,溶液 pH 由 7 左右升至约 8.6-9.0,并与菌体生长趋势一致,推测与蛋白胨代谢产生碱性物质有关。详见图1。

图1 TC931的系统发育关系及TC去除动力学

TC 去除机制:吸附与降解共同作用

机制分析显示,TC931 对 TC 的去除存在明显阶段性。培养初期,EPS和细胞表面对TC的吸附并不明显,此时TC去除主要来自水解和快速诱导的生物降解。随着培养时间延长,EPS和细胞表面吸附量逐渐增加,随后又出现下降,说明吸附可能既参与污染物捕获,也可能为后续降解提供局部富集条件。到培养后期,生物降解和生物吸附共同增强,形成连续去除过程。

初始 pH 对菌体生长影响不大,在pH 5、7和9条件下,最终OD600分别接近1.27、1.28和1.29,表明TC931具有较宽的pH适应范围。不同碳源对TC去除路径影响较明显:蛋白胨条件下EPS和细胞表面均可吸附TC,吸附量分别约为1.75 mg/L和0.38 mg/L;甘油条件下主要观察到细胞表面吸附;丝氨酸和葡萄糖条件下吸附贡献较弱,但仍可促进共代谢降解。

图2 初始培养基pH和不同碳源(10 g/L)分别对30℃ 2天内TC去除效率(A和B)以及溶液最终pH和细胞密度(C和D)的影响。误差线代表三次重复实验的标准偏差。R-T:残余TC; E-A:EPS吸附;C-A:细胞表面生物吸附;H+B:水解+生物降解;水解:在不同初始溶液pH或不同碳源溶液下水解

TC 的生物吸附位点和可能降解途径

FTIR结果表明,TC与菌体表面或EPS接触后,多个特征峰发生位移或强度变化,说明蛋白质、多糖和烃类相关官能团参与了结合过程。细胞表面的羧基、酰胺 N-H、C-OH 等基团,以及EPS中的酰胺I、酰胺III、多糖C-OH、糖苷C-O-C 和吡喃糖 C-OH 等结构,均可能是TC生物吸附的重要位点。由此可见,TC931的耐受和去除能力并非只依赖胞内代谢,而与其细胞外保护和富集结构密切相关。

产物分析显示,TC在TC931作用下可发生去甲基化、脱羟基、脱酰胺、开环水解、甲基化以及进一步断裂等反应。研究共鉴定出8种可能的生物转化产物,包括TP 431、TP 415.1252、TP 398.1495、TP 369.108、TP 417.209、TP 332.1353、TP 433.2424和TP 348.1919 等。作者认为,C-4位二甲氨基的去甲基化可能是TC生物降解的重要初始步骤,随后发生羟基脱除、D环开环和小分子片段脱除,最终形成结构更简单的产物。可能的降解路径见图3。

图3 TC931对TC的可能生物降解途径

基因组特征与生态安全性分析

TC931基因组为单环染色体,大小约5,777,749 bp,GC含量为43.57%,未检测到质粒。基因组共预测到4,783个基因和121个RNA基因,并发现23个基因岛。功能注释显示,该菌株含有较多与转运、催化活性、碳水化合物代谢、外源物质降解及代谢相关的基因,为其在TC胁迫下的存活和污染物转化提供了遗传基础。

需要注意的是,CARD数据库比对发现TC931染色体中含有8个抗性相关基因,包括2个adeF、3个aadS和1个tetX。adeF可能与RND型抗生素外排泵有关,tetX则编码黄素依赖型单加氧酶,被认为与四环素类抗生素失活密切相关。研究还发现 tetX与抗性基因岛可能在早期进化过程中通过水平基因转移获得。虽然该基因岛缺乏完整转移结构,可能稳定插入染色体,但仍存在在其他移动遗传元件辅助下恢复转移能力的风险。详见表1和图4。

表1 TC931基因组抗性基因

图4  COG (A)、KEGG (B) 和 GO (C) 获得的功能注释基因的百分比、分布和数量

03
结论

本研究从农田土壤中分离得到一株能够去除TC的常州纱线杆菌TC931。该菌株在TC胁迫下具有较强存活能力和去除能力,在培养第2天和第3天分别实现57.88%和87.38%的TC去除。TC931对TC的去除机制包括EPS生物吸附、细胞表面吸附和生物降解,其中生物降解在早期即可被诱导,吸附作用则在后续阶段增强并参与污染物富集。FTIR和产物鉴定结果说明,蛋白质、多糖和烃类官能团参与TC结合,TC 可进一步通过去甲基化、脱羟基、脱酰胺和开环水解等途径转化为多种产物。基因组分析表明,TC931携带 tetX、adeF等与四环素抗性和外排相关的基因,同时含有不完整抗性基因岛。总体来看,TC931可为四环素污染生物修复提供潜在菌种资源,但在实际应用前应重点评估抗性基因传播风险,并在长期修复过程中开展连续生态安全监测。

END

团队介绍

"新污染物检测与筛查评估"公众号由成都理工大学生态环境学院环境污染分析监测与修复技术科研创新团队负责人许淑霞教授课题组运营。本公众号主要发布新污染物相关文献传递、科普宣传、会议要闻、标准规范等推文。欢迎投稿及推广合作,有意者请联系1519323098@qq.com

团队主要研究方向:新污染物监测预警、筛查及评估研究;污染物快速检测新技术及小型化设备研究;基于纳米材料的多介质污染物去除研究;新污染物毒性预测及风险评估模型研究。本课题组欢迎各高校相关专业博士后、博硕士同学的加入,欢迎与高校和企事业单位进行合作与交流。有意者请联系xushux@cdut.edu.cn

作者:秦海亮

编辑:徐仁灵

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  113. /yingpanguazai/ssd/ssd1/www/h.mffb.com.cn/vendor/topthink/think-orm/src/db/Query.php ( 15.71 KB )
  114. /yingpanguazai/ssd/ssd1/www/h.mffb.com.cn/vendor/topthink/think-orm/src/db/BaseQuery.php ( 45.13 KB )
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