


2025年7月8日,贵州省农业科学院贵州省果树科学研究所/农业农村部喀斯特山区作物基因资源与种质创新重点实验室郑乾明团队在Plant Physiology and Biochemistry在线发表了题为“Functional characterization of tonoplast sugar transporter gene HpTST1 involved in soluble sugars accumulation during fruit development process of red pitaya (Hylocereus polyrhizus)”的研究论文。
该研究揭示了糖转运蛋白HpTST1在火龙果果实可溶性糖积累中的生理功能,为了解果实可溶性糖积累及果实风味和品质调控提供了指导。
研究背景
火龙果属仙人掌科,在我国南方和西南地区作为特色果树种植,具有耐旱和贫瘠的特点,适宜在喀斯特石漠化山地发展。火龙果果实外观独特,色泽鲜艳,酸甜可口,深受消费者喜爱。火龙果果实成熟期间快速积累大量可溶性糖,其含量和构成直接决定果实风味和品质。成熟果实中的可溶性糖主要在液泡积累,介导跨液泡膜转运的糖转运蛋白决定可溶性糖向液泡的转运和积累。火龙果液泡膜糖转运蛋白TST家族含有4个成员,可能参与糖向液泡的转运。目前不知道哪个TST成员以何种作用机制向液泡转运可溶糖,也不了解糖转运对果实可溶性糖积累的影响。
研究内容
火龙果果实发育和成熟期间,葡萄糖和果糖含量持续上升,肌醇和蔗糖保持相对不变。葡萄糖和果糖是成熟果实主要的可溶性糖类别,分别占总糖含量的 48.56%和 37.25%。果实发育和成熟期间,HpTST1显著上调表达,HpTST2.1、HpTST2.2 和 HpTST3表达量低且无明显变化(图1)。HpTST1是成熟果实中表达的主要TST成员,与果实可溶性糖积累高度相关。

Figure 1 Expression patterns of HpTSTs during different fruit developmental stages in red pitaya.
HpTST1启动子并连接报告基因在拟南芥表达,在子叶和胚根,幼苗子叶、叶脉、维管组织和根尖,植株莲座叶、萼片、花药和雌蕊柱头等检测到表达(图2)。HpTST1在源库组织及不同发育阶段均表达,说明其广泛参与碳代谢、能量或信号分子的提供。

Figure 2 Histochemical staining of GUS activity in transgenic Arabidopsis plants driven by the HpTST1 promoter.
在拟南芥和烟草叶肉细胞的亚细胞定位均表明HpTST1蛋白定位于液泡膜,在酵母表达证明HpTST1主要分布于液泡膜和液泡腔内,少量定位于质膜。在酵母糖吸收缺陷菌株表达证明HpTST1具有葡萄糖和果糖、葡萄糖类似物2-脱氧-D-葡萄糖的转运活性(图3),还具有蔗糖及其荧光类似物七叶苷的转运活性(图4)。

Figure 3 Monosaccharides uptake assays of HpTST1 protein in yeast cells

Figure 4 Sucrose uptake assay of HpTST1 protein in yeast cells
草莓果实瞬时表达表明HpTST1促进果实葡萄糖、果糖和蔗糖积累。在番茄植株表达,获得表达HpTST1的T2代转基因植株。转基因植株的高度显著增高,开花提早,成熟果实质量显著增加23.8%,可溶性固形物含量增加22.7%;叶片果糖、葡萄糖和蔗糖含量分别提高125.1%、136.4%和16.0%;果实果糖和葡萄糖含量分别提高35.6%和44.3%,蔗糖含量无显著差异(图5)。

Figure 5 Phenotypes alteration of HpTST1-transgenic tomato plants
研究结论与意义
研究揭示了糖转运蛋白HpTST1在火龙果果实可溶性糖积累中的生理功能:HpTST1是参与火龙果果实可溶性糖转运的TST家族主要成员;HpTST1不仅具有跨液泡膜转运葡萄糖、果糖等己糖活性,还具有跨液泡膜转运蔗糖活性;HpTST1介导葡萄糖、果糖和蔗糖向液泡内转运,促进果实可溶性糖的积累。研究结果为阐明火龙果果实可溶性糖的积累机制提供基础-HpTST1是调控胞质和液泡间可溶性糖转运的关键基因,促进可溶性糖向液泡转运并贮存;为改良果实风味和品质提供靶点-增加HpTST1表达促进可溶性糖向液泡转运及贮存,实现果实可溶性糖的丰富积累。
研究团队
贵州省农业科学院贵州省果树科学研究所/农业农村部喀斯特山区作物基因资源与种质创新重点实验室郑乾明博士为论文第一作者和通讯作者,王红林、晏霜、解璞和齐勇参与本研究。该研究获得国家自然科学基金(No.32060674)、贵州省科技计划项目(黔科合基础[2017]1178、黔科合平台人才-GCC[2022]025-1和黔科合服企[2024]003-1)的资助。
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本期编辑:
郑乾明 贵州省农业科学院果树科学研究所
文稿联系及审核:
刘坤 内蒙古农业大学农学院
排版校对:
李雨晴 内蒙古农业大学生命科学学院
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