内蒙古农业大学刘文俊研究员等:Lentilactobacillus diolivorans筛选及抑制霉菌特性

魏玥^1，2，3，李瑜^1，2，3，武芷伊^1，2，3，刘文俊^1，2，3*

（1.内蒙古农业大学，呼和浩特 010018；2.内蒙古农业大学乳业生物技术与工程教育部重点实验室，呼和浩特 010018；3.内蒙古农业大学国家饲料微生物资源研究中心，呼和浩特 010018）

摘　要：食二酸迟缓乳杆菌（Lentilactobacillus diolivorans，Lent. diolivorans）的模式株分离自青贮饲料，在饲料发酵中具有广泛应用。然而，目前该菌种优良种质资源少，涉及耐酸、抑制霉菌等与应用相关的性状研究较少。文章旨在获得具有优良耐酸特性和抑制霉菌活性的Lent. diolivorans，为青贮饲料提供优良乳酸菌补充剂。文章对分离自乳制品中的254株Lent. diolivorans进行耐酸（pH3.0）筛选，筛选出1株耐受性最好的菌株Lent. diolivorans IMAU13829。通过96孔板法和双层平板法测定其抑制霉菌活性，采用蛋白酶处理和酸处理等方法分析乳酸菌抑制霉菌的有效成分，并进行了形态学特征描述和安全性试验。结果表明，菌株Lent. diolivorans IMAU13829对黑曲霉、娄地青霉、串珠镰刀菌具有显著抑菌活性，推测其抑制霉菌的物质为有机酸类。菌株Lent. diolivorans IMAU13829对卡那霉素具有耐药性，不产生溶血反应。综上所述，文章筛选出1株Lent. diolivorans IMAU13829可用作青贮饲料补充剂，抑制霉菌繁殖，改善青贮品质。

关键词：Lentilactobacillus diolivorans；筛选；耐酸特性；霉菌；抑菌活性；抑菌物质；安全性试验；饲料补充剂

中图分类号：TS201.3

文献标识码：A

DOI:10.19827/j.issn1001-2230.2026.02.003

0　引　言

Lent.diolivorans属迟缓乳杆菌属（Lentilactobacillus），为革兰氏阳性，无运动、无胞子形成的杆状细胞，以单细胞、成对或偶尔短链的形式出现。Lent. diolivorans模式株最初分离于玉米青贮饲料，为兼性厌氧，异型乳酸发酵。研究表明，Lent. diolivorans具有将1，2-丙二醇发酵为1-丙醇和丙酸的能力^[1]。欧洲食品安全局已认定该菌株可作为改善饲料青贮技术的青贮添加剂，提高青贮饲料好氧稳定性^[2]。目前国内外对该菌的研究集中于菌株的酶学特性及利用该菌种工业生产醇类物质等方面^[3-4]，对菌株Lent. diolivorans的耐受特性及抑菌能力等基本信息了解甚少，对安全性和作为生物添加剂在饲料青贮中的应用研究尚且不足。

青贮饲料在发酵和贮存过程中极易受霉菌污染。霉菌污染始终是饲料产业中不可忽视的问题，常见的霉菌主要有镰刀菌属、曲霉菌属和青霉菌属，这些霉菌常导致青贮原料在收获前就产生污染^[5]。其中，串珠镰刀菌是侵染多种重要饲料作物的优势真菌，能产生多种毒性代谢产物，严重影响饲料营养和品质^[6]。黑曲霉则广泛存在于粮食及植物作物中，因高温胁迫侵染作物而产生毒素。娄地青霉菌作为产毒素菌株，可在低pH的典型青贮环境中生长^[7]，是青贮贮藏期间最常见的霉菌之一。目前，为防止饲料青贮霉菌污染，常见的抑制霉菌方法有化学法和生物法。研究表明，化学法可能会含有对环境和动物产生危害的化学成分，因而被限制应用和发展。因此，通过微生物抑制青贮中的霉菌便显得尤为迫切。

乳酸菌常被用作青贮饲料添加剂，通过厌氧呼吸产酸可降低青贮环境pH值，不仅可抑制霉菌等腐败微生物的生长和繁殖，还可实现长期保存饲料及提高其营养物质的目的^[7]。近些年，国内外已筛选出许多特性优良且能抑制霉菌的乳酸菌。王晓宇等^[8]从泡菜中筛选出1株具有优良特性的，能够抑制霉菌的菌株Lactiplantibacillus（Lact.）plantarum ST3.5。MARLIDA等^[9]筛选出1株有效抑制黄曲霉的菌株Schleiferilactobacillus harbinensis strain 487，可应用于玉米饲料中，作为解毒素AFB1的新型生物药剂。时子瑶^[10]筛选出1株安全性良好的菌株Lacticaseibacillus paracasei R8，能抑制饲料中禾谷镰刀菌，提高青贮品质。尽管普遍认为大部分乳酸菌是安全的，但对菌株耐药性和毒性的安全性检测试验仍然十分必要。

本文对实验室保藏的分离于乳及自然发酵乳制品的254株Lent. diolivorans进行耐酸特性筛选。以耐酸特性良好、抑真菌能力较好的菌株Lact. plantarun P-8^[11]和该种的模式菌株Lent. diolivoransDSM 14421^T作为对照菌株。对耐酸特性良好的菌株进行抑制霉菌活性试验，探究乳酸菌抑制霉菌的有效成分，并对其形态特征及体外安全性进行评价。以期获得1株可作为潜在的青贮饲料乳酸菌补充剂，用于改善青贮饲料品质，为Lent. diolivorans在饲料青贮方面的应用提供参考。

1　材料与方法

1.1   材料与试剂

        254株Lent. Diolivorans（均分离于乳及自然发酵乳制品），国家饲料微生物种质资源库（内蒙古）；菌株Lent. diolivoransDSM 14421^T，德国DSMZ保藏中心；Lact. plantarumP-8，国家饲料微生物种质资源库（内蒙古）；黑曲霉 CICC 2485、娄地青霉CICC 40663、串珠镰刀菌CICC 2490 3株指示霉菌，中国工业微生物菌种保藏管理中心；马铃薯葡萄糖琼脂培养基（Potato dextrose agar，PDA）、马铃薯液体培养基（含氯霉素）、脱纤维无菌绵羊血，青岛海博生物技术有限公司；抗菌药物药敏纸片，杭州微生物试剂有限公司；胃蛋白酶、胰蛋白酶、蛋白酶K，北京索莱宝科技有限公司；无菌滤器，德国默克集团。

1.2　仪器与设备

PHS-3E型pH计，上海仪电科学仪器股份有限公司；MULTISKAN ASCENT型酶标仪，赛默飞世尔上海仪器有限公司；SX-500型高压蒸汽灭菌锅，上海智城仪器制造厂；KDC-1044型立式低速离心机，德国Eppendorf公司；CX33型光学显微镜，日本OLYMPUS公司；5810R型台式高速离心机，德国Eppendorf公司；Voitex-genie2型涡旋振荡器，美国LifeTechnologies公司；LRH-CL/CA/CB系列低温培养箱，上海一恒科学仪器有限公司；ZHJH-C1214C型超净工作台，上海智城仪器制造厂。

1.3　试验方法

1.3.1　培养基及试剂配制

MRS液体培养基：蛋白胨10.0 g，磷酸氢二钾2.0 g，柠檬酸三钠2.0 g，无水硫酸镁0.2 g，牛肉膏10.0 g，酵母粉5.0 g，葡萄糖20.0 g，无水乙酸钠5.0 g，吐温80 1.0 g，无水硫酸锰0.054 g，调节pH至6.2±0.2。

MRS固体培养基：琼脂13 g，其他配方与液体培养基相同。

以上培养基均于121 ℃下灭菌15 min。

孢子洗脱液：吐温80 0.5 g、NaCl 8.5 g溶解于1 000 mL蒸馏水中，115 ℃高压蒸汽灭菌30 min，冷却备用。

保护剂：脱脂乳粉 6.43 g/100 mL、蔗糖 13.03 g/100 mL、甘油6.88 g/100 mL，分别溶解于蒸馏水中，121 ℃高压蒸汽灭菌20 min，冷却备用。保护剂与霉菌孢子悬液体积比为2∶1^[12]。

生理盐水：NaCl 0.85 g/100 mL。

1.3.2　乳酸菌菌种的活化与培养

将以冻干粉形式保藏在安瓿管中的Lent. diolivoran菌株在MRS液体培养基中活化，采用平板划线法对单菌落进行分离。37 ℃厌氧培养48 h后分别挑取单菌落于MRS液体培养基中，连续培养至3代进行后续试验。其中，每1代都需要进行革兰氏染色和镜检，观察菌株是否有污染。 

1.3.3　霉菌菌种的活化与培养

将购买的3株霉菌（冻干粉）分别接种到马铃薯液体培养基（含氯霉素）中，30 ℃培养5~7 d。在无菌环境中挑取霉菌孢子，于PDA斜面培养基上划线并连续培养至3代用于后续试验。

1.3.4　具有耐酸特性菌株的筛选

将培养至3代的Lent. diolivorans菌株接种于pH=3的MRS液体培养基中，每组设置3个平行。37 ℃厌氧培养24 h。于600 nm下测各组菌液0 h和24 h下的光密度(OD)值，△OD600越高，耐受性越好。以对照菌株Lact. plantarum P-8的△OD600作为初筛标准，将△OD600接近或优于P-8的菌株进一步筛选。将培养至3代的菌株接种于pH=3的MRS液体培养基中进行复筛，采用10倍稀释法取合适梯度稀释菌液。采用平板计数法测定活菌数并计算菌株存活率。对酸的耐受性试验是参考HUANG等^[13]的研究方法，并稍作修改。

菌株的存活率按下式计算。

式中：N1为3 h测定的活菌数，CFU/mL；N0为0 h测定的活菌数，CFU/mL。

1.3.5　抑制霉菌活性试验

(1)乳酸菌发酵上清液（Cell- free supernatant，CFS）的制备。将培养至3代的菌株Lent. diolivorans IMAU13829、Lact. plantarum P-8、Lent. diolivoransDSM 14421^T，在4 000 r /min离心10 min，弃去菌体沉淀，保留上清液，经0.22 μm无菌滤器过滤制得CFS。在相同条件下处理未接种乳酸菌的MRS液体，4 ℃保存备用。

(2)霉菌孢子悬浮液的制备。用胞子洗脱液将培养至3代的霉菌PDA斜面进行冲洗，将洗好的胞子悬液震荡均匀。通过无菌纱布过滤除去营养菌丝体^[14]，制成1×10⁶个/μL霉菌胞子悬浮液，用生理盐水分别稀释至合适梯度，4 ℃备用。

(3)96孔板法初步筛选。在96孔板中将100 μL霉菌胞子悬浮液与100 μL的乳酸菌CFS或等量的MRS液体混匀^[15]。25~30 ℃培养48 h，测定OD600值，抑菌率按下式计算。

抑菌率(%)=100-(ODLAB×100/ODcontrol)  

式中：ODLAB为霉菌孢子在乳酸菌发酵上清液中培养48 h测定的OD600值；ODcontrol为霉菌胞子在MRS液体中培养48 h测定的OD600值。

(4)双层琼脂平板法复筛。参照JUODEIKIENE等^[16]的研究方法，先将乳酸菌在MRS固体培养基上平板划线后，分别培养24 h和48 h，倾倒含有霉菌孢子悬浮液的PDA培养基制成双层琼脂平板，以未添加乳酸菌的平板为空白对照（Control check，CK）。25~30 ℃正置平板，培养48 h后观察结果。

1.3.6　抑制霉菌活性物质分析

为分析乳酸菌CFS对3种霉菌起抑制作用的活性物质，本试验通过蛋白酶处理和酸处理试验对乳酸菌抑制霉菌的活性物质进行分析。

(1)酸处理。以未处理的乳酸菌CFS为对照，将乳酸菌CFS的pH分别调至3.0、4.0、5.0、6.0，用96孔板法进行抑菌率测定。

(2)蛋白酶处理。以未处理的乳酸菌CFS作为对照，将乳酸菌CFS分别调至胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K的最适pH。将3种蛋白酶以1 mg/mL的终浓度分别加入到调过pH的CFS中，于37 ℃水浴2 h后，100 ℃水浴处理5 min使酶失活，用96孔板法测定抑菌率。

1.3.7　IMAU13829安全性试验

(1)溶血性试验。β-溶血，指所有红细胞均被水解，在菌落周围形成清晰的透明区；α-溶血，指红细胞部分水解，在菌落周围形成绿色区域；γ-溶血，指红细胞无反应且菌落周围无溶血^[17]。为评估菌株Lent. diolivorans IMAU13829溶血活性，将菌株在含6%脱纤维绵羊血的BLB琼脂板上划线培养。以菌株Staphylococcus aureus ATCC 12600^T为阳性对照（β-溶血）^[18]。

(2)抗生素耐药性试验。抗微生物药物敏感性是评价乳酸菌安全性最重要的指标，本试验采用纸片扩散法测定菌株Lent. diolivorans IMAU13829的药敏性。将菌株制成菌悬液，用0.85%的生理盐水调节浓度至0.5麦氏单位。取100 μL菌悬液涂布到MRS琼脂培养基上。将含有定量抗菌药物的药敏纸片完全贴附到琼脂平板上，培养18~24 h后观察并记录产生透明抑菌圈的大小。抑菌圈的大小反映细菌对测定药物的敏感程度。Lent. diolivorans属于革兰氏阳性菌，目前还没有关于该属菌株的抗菌药物敏感性试验的具体标准^[19]，本试验参考标准（CLSI M100ED32-2022）《抗菌药物敏感性试验性能标准》^[20]中肠杆菌科的抑菌圈直径解释标准和国家标准《抗菌药物敏感性试验的技术要求》^[21]中对乳杆菌的抗菌药物敏感性试验要求，对菌株Lent. diolivorans IMAU13829进行药物敏感性分析。

1.4　数据处理

所有试验重复3次，结果以平均值±标准差表示。利用SPSS R 26.0软件对数据进行统计分析，采用单因素方差分析（ANOVA）检验，P<0.05为有统计学差异。采用Origin 2018软件绘图。

2　结果与分析

2.1　菌株耐酸能力分析

对酸性环境的耐受性是筛选优良青贮乳酸菌补充剂的重要因素，青贮饲料发酵过程中需添加外源乳酸菌使青贮环境pH在3.8~4.2左右，当pH下降至3.8时，酸性环境能抑制真菌等腐败菌的生长，但乳酸菌自身的生长也会受到抑制^[22]，进而影响青贮饲料的发酵进程。因此，为提高青贮饲料品质，应筛选具有优良耐酸特性的乳酸菌作为青贮补充剂。本研究将分离于乳及自然发酵乳制品中的254株Lent. diolivorans菌进行初步筛选，筛选出5株在pH=3环境中生长较好的Lent. diolivorans菌株，见图1（a）。△OD600均大于0.1，且均优于对照菌株P-8（△OD600=0.13）。对初步筛选出的菌株IMAU13829、IMAU13749、IMAU13730、IMAU13856和IMAU20720测定其活菌数，并计算菌株存活率，见图1（b）。结果表明，菌株IMAU13829在pH=3时生长良好，表现出较高的存活率为91.4%，与对照菌株P-8（93.2%）存活率数值相近，具有良好的耐酸特性。

图1　菌株耐酸能力

2.2　IMAU13829抑制霉菌活性分析

2.2.1　96孔板法

GEREZ等^[15]研究表明，含有乳酸菌发酵上清液的孔对霉菌有抑制作用，其中有10株菌株对试验中所有霉菌菌株的抑菌率均大于80%，抑菌效果较好。本试验结果显示，含有菌株IMAU13829、P-8和DSM 14421^T发酵上清液的孔中只有少量甚至没有菌丝生长，而MRS液体（对照组）中有大量菌丝生长。经计算，菌株IMAU13829、P-8和DSM 14421^T对黑曲霉抑菌率分别为95.35%、95.23%、95.04%，说明3株乳酸菌对黑曲霉均有较好的抑菌效果；对娄地青霉的抑菌率分别为44.38%、47.98%、36.66%；对串珠镰刀菌的抑菌率分别为86.83%、86.51%、86.02%。由图2可见，菌株IMAU13829对黑曲霉和串珠镰刀菌的抑菌率均大于80%，抑菌效果最好；对娄地青霉的抑菌率小于80%，抑菌效果较弱。

图2　不同乳酸菌对不同霉菌的抑菌活性

2.2.2　双层平板法复筛

透明区域的大小可反映乳酸菌对霉菌的抑制能力，透明圈的范围越大表示抑菌活性越强。不同乳酸菌菌株抑菌能力的差异可能与其所产抑菌成分的种类和抑菌活性有关^[23]。乳酸菌CFS中存在多种抑菌物质，目前被认定为有效抑菌的物质主要包括有机酸、过氧化氢和细菌素等^[24]。由图3可见，与空白对照组（CK）相比，添加了乳酸菌IMAU13829、P-8、DSM 14421^T的处理组中菌株划线处周围均有透明区域。3株乳酸菌在对黑曲霉和娄地青霉的抑制中，菌株IMAU13829的抑菌区域最大，霉菌的生长受到明显抑制，菌株P-8和DSM 14421^T的抑菌区域显著小于IMAU13829。在对串珠镰刀菌的抑制中，IMAU13829和P-8的抑菌区域显著大于DSM 14421^T。此外，对于同一株乳酸菌，培养48 h较培养24 h的抑菌区域更加明显。有研究发现，菌株Lactobacillus coryniformis subsp.coryniformis strain Si3在稳定期的抑菌活性最强，超过48 h其抑菌活性迅速下降^[25]。这可能由于抑菌活性物质参与了代谢过程或是被酶降解导致。以上结果表明，菌株IMAU13829对3株霉菌均有抑制区域，其中对黑曲霉和串珠镰刀菌的抑菌区域最大，对娄地青霉的抑制区域最小。菌株IMAU13829的抑菌活性随培养时间的延长而增强，说明菌株的抑菌物质可能在生长稳定期达到了一定量积累。

图3　双层琼脂平板法

2.3　IMAU13829抑制霉菌活性物质分析

由图4可见，经蛋白酶处理的乳酸菌CFS抑菌率与未经处理的乳酸菌CFS抑菌率无统计学差异（P<0.05）。酸处理结果显示，当菌株IMAU13829的发酵上清液pH调整为3.0时，IMAU13829对3种霉菌的抑制率几乎不受影响，与未处理的乳酸菌CFS抑菌率无统计学差异；而在pH4.0~6.0范围内，抑菌活性受影响，抑菌率显著降低。由此可知，乳酸菌CFS抑菌活性受pH变化影响较大，且pH越接近中性，抑菌率越低，并且较未经处理的乳酸菌CFS抑菌率有统计学差异（P < 0.05）。因此，推测菌株IMAU13829的抑菌作用可能来源于有机酸类的酸性物质。

图4　IMAU13829发酵上清液经不同处理后的抑菌率

2.4　IMAU13829的形态学特征

由图5（a）可见，IMAU13829在MRS固体培养基上菌落较小，为直径小于1 mm，呈灰白色透明，边缘不规则，光滑的圆形菌落。由图5（b）可见，挑取单个菌落进行革兰氏染色，通过电子显微镜观察到IMAU13829为革兰氏阳性菌，单个细胞呈短杆状。

图5    IMAU13829菌落和显微镜下（1000 ×）形态

2.5　IMAU13829安全性试验结果分析

2.5.1　溶血性试验

由图6可见，IMAU13829周围的琼脂未显示绿色，说明未产生α-溶血；与阳性对照菌株（β-溶血）相比较，也未出现透明圈，即不产生β-溶血。结果显示，菌株IMAU13829为γ-溶血，不产生溶血反应，也不具有溶血特性，无致病性。

图6　溶血试验

2.5.2　抗生素耐药性分析

IMAU13829对20种抗生素药物的敏感性见表2。结果表明，IMAU13829对卡那霉素表现出耐药性，对其余19种药物均表现敏感。

表2　IMAU13829抗生素药物敏感性

3　讨　论

为获得Lent. diolivorans菌种的优良种质资源，本试验对耐酸特性良好的菌株Lent. diolivorans IMAU13829进行了抑制霉菌活性试验及体外安全性评价。一些性状优良的乳酸菌菌株发酵后可迅速降低青贮饲料的pH值，从而提高有机酸含量，抑制有害微生物繁殖。董柯等^[26]从自然青贮饲草中筛选出对低pH耐受性较强的Lact. plantarun G17和Lact. plantarun Y17，用于调制玉米青贮饲料发酵过程，提高饲料品质。陈娟等^[27]从尾菜青贮中筛选出1株可耐受pH3.5的Lactobacillus acidophilus R-3，用作制备尾菜青贮发酵剂的优质菌株。由于乳酸菌菌株的来源不同，菌株对酸的耐受能力有所差异。然而，目前用于制备青贮饲料的优良菌株大部分为植物来源，对乳制品来源的菌株研究较少，缺乏具有优良特性的菌种资源。自然发酵乳制品因其独特的低pH环境，从中分离筛选出的菌株普遍对酸具有一定耐受性。汤凯等^[28]从伊犁地区奶疙瘩中筛选出8株具有良好耐酸特性和功能特性的乳酸菌，作为功能发酵食品的潜在菌株。雷雪艳等^[29]从内蒙古地区自然发酵乳中分离筛选出4株可耐受pH为3的Lactobacillus kefiranofaciens菌株，作为潜的在益生菌开发利用。本试验从自然发酵乳中筛选出1株耐酸特性较好的Lent. diolivorans IMAU13829，作为制备青贮饲料的优良菌株。但是，关于Lent. diolivorans菌株的耐受特性在以往的研究中鲜有报道，对于乳酸菌的耐受机理机制尚不清楚，因此未来还需从基因组水平方面挖掘与之相关的调控耐酸特性基因。

乳酸菌在发酵过程中会产生有机酸、抗真菌肽等代谢产物，能够抑制真菌生长、促进青贮饲料有氧稳定性，提高青贮品质。这是由于乳酸菌在发酵过程中产生大量有机酸，有机酸的存在降低了环境的pH值，进而起到对其他有害微生物的拮抗作用^[30]。LAY等^[31]研究发现2株乳酸菌菌株对青霉菌和黑曲霉显示出抑菌活性，经验证，其中主要的抑菌物质为乳酸、乙酸和丙酸。CHEN等^[32]发现，具有较强抗霉菌活性的Lact. plantarun CKXP13和Lact. plantarun CWXP24发酵上清液中主要的抗霉菌活性物质为有机酸。然而，未来研究还需进一步测定乳酸菌发酵上清液中抑菌物质的详细成分及含量。本试验通过体外试验探究菌株Lent. diolivorans IMAU13829对3种霉菌的抑制活性，通过蛋白酶处理和酸处理发现，经酸处理的菌株对霉菌的抑制活性与未处理组的抑菌活性有统计学差异。因此推测，菌株Lent. diolivorans IMAU13829发酵上清液中的抑菌物质为酸性物质，这与之前的研究结果一致。但研究中还需更多试验来验证Lent. diolivorans IMAU13829在饲料青贮中对霉菌的抑制效果，测定其抑菌物质的主要成分，深入研究添加Lent. diolivorans菌株对青贮饲料品质质量的影响。

尽管大部分乳酸菌普遍被认为具有安全性，但对于菌株的耐药性、溶血性、是否产生有害代谢产物的检测仍必不可少。研究表明，如Lact. plantarun、Lacticaseibacillus casei、Lactobacillus acidophilus等乳酸菌对一些常见抗生素有不同程度的耐受性，个别菌株甚至还有多重耐药性^[33-34]；许多菌株的溶血特性均与致病性相关，菌株产生溶血素可能会参与致病过程甚至引起严重的致病损伤^[35]。因此，对乳酸菌安全性评价十分必要。李晓颖等^[36]对5株Lact. plantarun进行溶血性试验，结果表明菌株均无溶血现象，不具有溶血特性，菌株可安全应用。研究表明，大部分乳酸菌对卡那霉素等抗革兰阴性菌的抗生素表现出耐药性^[37]。虽然耐药基因的存在会使乳酸菌对抗生素产生耐药性，但并非所有耐药基因都可通过水平基因转移到环境中或病原菌上^[38]，进而导致病原菌的耐药性传播。尽管如此，后续研究仍有必要从基因水平上注释抗生素耐药基因和毒力基因，并进一步结合动物试验和临床试验等安全性试验对菌株进行综合评价。本试验通过抗生素药物敏感性试验和溶血试验对Lent. diolivorans IMAU13829进行初步的安全性评价。结果表明，在对20种抗生素药物敏感性试验中，菌株Lent. diolivorans IMAU13829仅对卡那霉素耐药，并未出现严重的多重耐药性问题，不产生溶血反应，不具有溶血性，可安全应用。

4　结　论

本文筛选出1株耐酸特性良好的菌株Lent. diolivorans IMAU13829，该菌株对黑曲霉、娄地青霉、串珠镰刀菌这3种青贮饲料中常见的霉菌具有显著抑菌活性。通过蛋白酶处理和酸处理等试验，推测菌株Lent. diolivorans IMAU13829的抑菌物质为有机酸类。对20种常见的抗生素药物敏感性试验结果显示，Lent. diolivorans IMAU13829仅对卡那霉素具有耐药性，对其余19种抗生素药物均表现敏感。溶血试验结果显示，Lent. diolivorans IMAU13829不产生溶血反应。综上所述，菌株Lent. diolivorans IMAU13829具有良好的耐受性和抑制霉菌特性，可作为潜在的青贮饲料乳酸菌补充剂，用于改善青贮饲料品质，研究结果为乳酸菌在青贮饲料中的应用提供了参考。

（参考文献略）

编辑：王   菲

         马   艳

校对：王   鑫

审核：姜　爽