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中国农业大学科研团队在 Nature(Q1/48.5)发文!创制广谱抗病水稻新资源

  • 2026-06-21 05:43:17
中国农业大学科研团队在 Nature(Q1/48.5)发文!创制广谱抗病水稻新资源
水稻是全球超半数人口的主粮,稻瘟病、纹枯病、稻曲病、胡麻叶斑病、恶苗病、穗腐病等多种真菌病害常年造成大幅减产,化学农药防控成本高、环境污染严重。培育广谱抗病品种是绿色稳产最优方案,但现有商用水稻品种难以实现对多种真菌同时抗病。感病基因编辑是抗病育种热门方向,但多数 S 基因敲除后伴随株高、产量劣变,难以落地应用。中国农业大学彭友良团队在 Nature 发表研究,揭示多类病原真菌保守效应蛋白 Gas 靶向水稻 SnRK1β1A 实现侵染的分子通路,利用 CRISPR 敲除该基因可在不损失常规农艺与产量前提下,获得广谱抗多种真菌病害水稻,为水稻抗病育种提供关键靶点与育种新材料。
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通讯作者及单位、邮箱
You-Liang Peng
State Key Laboratory of Agricultural and Forestry Biosecurity and MARA Key Laboratory of Pest Monitoring and Green Management, China Agricultural University, Beijing, China.
pengyl@cau.edu.cn
核心内容
结果 1:六大水稻致病真菌进化出保守毒力蛋白 Gas2。研究通过序列比对发现稻瘟菌、纹枯病菌、稻曲病菌、胡麻斑病菌、恶苗病菌、赤霉病菌均编码保守 Gas2 效应蛋白,亲缘关系远的腐生真菌无功能性 Gas2;各真菌来源 Gas2 均可互补稻瘟菌 Δgas2 突变体致病缺陷,缺失 C 端 α 螺旋的 Gas2 丧失毒力;Gas2 由附着胞阶段特异表达、分泌至水稻细胞并定位于细胞核,过量表达 Gas2 的水稻对 6 种真菌全部更易感,Gas2 可抑制水稻几丁质触发的 ROS 爆发与抗病基因表达,明确 Gas2 是跨物种保守关键致病效应子。
结果 2:Gas2 特异性结合水稻 SnRK1β1A 蛋白。利用酵母双杂筛选获得 Gas2 水稻靶标 SnRK1β1A,经 GST pull-down、Co-IP、BiFC、LCI 等多重互作验证,六种病原真菌的 Gas2 均可结合 SnRK1β1A,非致病同源蛋白 Gas2L 不能互作;二者结合区域分别为 Gas2 的 DUF3129 结构域、SnRK1β1A 的 βCTD 结构域,互作主要发生在植物细胞核内。
结果 3:SnRK1β1A 是水稻广谱感病负调控基因,敲除后广谱抗病。病原真菌侵染可显著诱导水稻各组织 SnRK1β1A 基因上调;CRISPR 敲除 ZH11 水稻 SnRK1β1A 获得突变体,室内接种试验表明突变体对试验全部六种真菌病害抗性显著提升;SnRK1β1A 过表达株系抗病性大幅下降,证实该基因为病害易感基因。
结果 4:多年多点田间试验证实 snrk1β1a 突变体稳产且广谱抗病。在北京、辽宁盘锦 / 东港、湖北恩施多点开展多年田间自然发病鉴定,snrk1β1a 无外源转基因株系叶瘟、穗瘟、纹枯、稻曲病发病指数显著低于野生型;常规栽培条件下株高、分蘖、千粒重等关键农艺性状与野生型无显著差异,病害高发田块突变体结实率、单株产量优于野生型,仅存在抽穗略提前、耐盐性下降两个次要性状缺陷。
结果 5:Gas2 通过抑制 SnRK1β1A 泛素化降解并促其入核。SnRK1β1A 依靠 26S 蛋白酶体途径降解,关键泛素位点为 K267;Gas2 结合 SnRK1β1A 遮蔽 K267 位点,阻碍泛素修饰、提升蛋白稳定性;Gas2 自身 NLS1 核定位序列既负责自身入核,又驱动细胞质 SnRK1β1A 转运进细胞核,缺失 NLS1 的 Gas2 丧失互作与致病能力。
结果 6:SnRK1β1A 在胞质结合并抑制抗病关键 SnRK1α1 激酶。SnRK1α1 是水稻广谱抗病正向激酶,SnRK1β1A 在细胞质与其结合,阻碍 SnRK1α1 入核、直接抑制激酶活性与底物 XB2 磷酸化;snrk1β1asnrk1α1 双突变体丧失广谱抗病表型,证明敲除突变体抗性完全依赖 SnRK1α1 通路;Gas2 入核后进一步强化二者互作,持续抑制 SnRK1α1 功能。
结果 7:转录组证明 SnRK1β1A 抑制植保素与抗病通路基因。转录组测序显示,snrk1β1 突变体中萜类植保素合成、MAPK、植物 - 病原互作等抗病通路基因大量上调,SnRK1β1A 过表达株上述基因显著下调;二萜类植保素合成基因被 SnRK1β1A 强烈抑制,是突变体广谱抗病重要分子基础,同时该基因调控开花基因表达,解释突变体提早抽穗表型。
图解
图 1:系统验证 Gas2 是六大真菌共用保守毒力因子。从基因回补、基因敲除、水稻过表达接种多病害等多维度,证明缺失 Gas2 真菌致病力下降,水稻过 Gas2 后全谱系真菌侵染加重,同时证明 Gas 可分泌并进入水稻细胞核。
图 2:多体系验证 Gas2 与 SnRK1β1A 互作,SnRK1β1A 负向调控抗性。多类真菌 Gas 均可结合靶蛋白;病菌侵染诱导 SnRK1β1A 上调;基因敲除水稻抗 6 种病害,基因超表达水稻易感病。
图 3:Gas2 保护 SnRK1β1A 不被降解、协助核转运。Gas 通过阻断 K267 泛素减少靶蛋白降解;Gas 的 NLS1 是入核和蛋白互作必需元件,突变 NLS1 失去促入核和致病功能。
图 4:SnRK1β1A 束缚 SnRK1α1、抑制其激酶活性。胞质互作截留 SnRK1α、降低其核富集与 XB2 磷酸化,Gas 促进核内二者结合持续抑制免疫激酶。
研究展望
育种应用:依托该靶点利用 CRISPR 编辑各地主栽水稻品种,快速培育多病害绿色抗病新品种,减少农药施用;针对突变体耐盐偏弱短板,通过分子标记辅助育种改良耐盐性状。
广谱拓展:在小麦、玉米等禾本科作物同源基因中开展功能验证,探究保守育种靶点,拓宽 Gas-SnRK 调控模块在粮食作物抗病育种应用范围。
药剂开发:以 Gas2、SnRK1β1A 互作位点为靶标,筛选小分子抑制剂,创制新型广谱绿色杀菌剂。
机理深挖:解析 SnRK1β1A 调控抽穗、耐盐的分子通路,精细解析 SnRK 能量通路与植物免疫交叉调控网络。

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